技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES非標(biāo)記(Label-free)交互分析是科學(xué)家用于研究生物分子之間相互作用的重要方法,艾柏森生物研究團(tuán)隊(duì)可運(yùn)用*的Biacore、 ProteOn和octet系統(tǒng)對(duì)抗體的親和力和動(dòng)力學(xué)進(jìn)行測(cè)量。這些系統(tǒng)主要基于光學(xué)效應(yīng)的技術(shù)-表面等離子體共振(Surface Plasmon Resonance, SPR)和生物膜層表面干涉技術(shù)(bio-layer interferometry, BLI),可直接檢測(cè)分子間相互作用并進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。
親和力動(dòng)態(tài)測(cè)定方法-表面等離子共振法(SPR)是一種生物大分子相互作用分析(biomolecular interactionanalysis, BIA)技術(shù),這種技術(shù)基于表面等離子共振的物理光學(xué)現(xiàn)象的生物傳感分析技術(shù),不必使用熒光標(biāo)記或同位素標(biāo)記,從而讓保持了生物分子的天然活性,而且可實(shí)時(shí)檢測(cè)抗原-抗體等生物大分子相互作用的全過(guò)程。
SPR光譜可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)傳感芯片表面液相折射率的變化,而這一變化和傳感芯片表面所結(jié)合的生物分子的質(zhì)量成正比,用共振單位(Responseunit,RU)相對(duì)時(shí)間來(lái)表示。因此,通過(guò)分析反應(yīng)過(guò)程中各時(shí)刻的SPR光譜,可在非標(biāo)記的情況下監(jiān)測(cè)生物分子間的相互作用。
Figure 1. The schematic illustration of surfaceplasmon resonance (SPR) system
SPR技術(shù)特點(diǎn):
★ Lable-Free技術(shù),無(wú)需利用熒光素、同位素等分子檢測(cè)
★ Real-Time技術(shù),可直接、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)相互作用的全過(guò)程
★ 獲得分子相互作用的親和力及熱動(dòng)力學(xué)信息
★ 光路不經(jīng)過(guò)樣品,不受樣品顏色影響
★ 樣品消耗低,自動(dòng)化程度高
結(jié)果交付
★ 親和力報(bào)告(定量分析):結(jié)合常數(shù)(Ka)、解離常數(shù)(Kd)和親和常數(shù)(KD)
★ 電子圖片&完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)步驟、使用試劑、儀器、軟件檢索參數(shù)等
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