聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)是一種對特定的靶核酸片段在體外進行快速擴增的方法，通常由變性—退火—延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成，通過不同溫度的循環(huán)實現(xiàn)靶核酸的擴增。

實時熒光PCR技術(shù)是在PCR技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的核酸擴增與實時檢測技術(shù)，將熒光染料或熒光探針引入PCR反應(yīng)體系，利用每一溫度循環(huán)熒光信號的積累實時監(jiān)測整個PCR進程。由于在PCR擴增的指數(shù)時期，熒光信號達到設(shè)定閾值時反應(yīng)的循環(huán)數(shù)（Ct值）和被測模板的起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系，因而可用來進行定性及定量分析。

聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發(fā)、皮膚或血液，只要能分離出一丁點的DNA，就能用PCR加以放大，進行比對。這也是“微量證據(jù)"的威力之所在。由1983年美國Mullis首先提出設(shè)想，1985年由其發(fā)明了聚合酶鏈反應(yīng)，即簡易DNA擴增法，意味著PCR技術(shù)的真正誕生。到如今2013年，PCR已發(fā)展到第三代技術(shù)。1976年，中國科學家錢嘉韻，發(fā)現(xiàn)了穩(wěn)定的Taq DNA聚合酶，為PCR技術(shù)發(fā)展也做出了基礎(chǔ)性貢獻。

PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度（72°C左右），DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。基于聚合酶制造的PCR儀實際就是一個溫控設(shè)備，能在變性溫度，復(fù)性溫度，延伸溫度之間很好地進行控制。

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