服務(wù)項(xiàng)目

(Service Items)

周期（周）

Time(weeks)

方案一：

噬菌體展示技術(shù)

（Phage Display）

方案二：

異源表達(dá)重組技術(shù)

(Heterogeneous Recombination)

多肽

Peptide

小分子

Molecular

磷酸基/甲基/乙基化多肽

Phosphate/Methyl/

acetyl-specific

目前只有針對部分腫瘤相關(guān)通路熱點(diǎn)分子的抗原，詳情請與公司技術(shù)人員溝通

多肽設(shè)計(jì)與合成

Peptide design & synthesis

多肽設(shè)計(jì)

Peptide design

~2

可選，免費(fèi)

多肽合成

Peptide synthesis

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小分子或多肽偶聯(lián)

conjugation

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免疫階段

Immunization

免疫2只兔子

Immunized 2 rabbits

~8

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ELISA檢測

Elisa detection

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cDNA制備

cDNA preparation

逆轉(zhuǎn)錄制備cDNA文庫

prepare cDNA library by RT-PCR

~1

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cDNA 文庫質(zhì)檢

cDNA library QC check

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構(gòu)建Fab抗體庫

Fab library   construction

VH與VL基因獲得

obtained VH and VL   genes

10~15

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構(gòu)建初級抗體庫

primary antibody   library construction

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構(gòu)建Fab抗體庫

Fab library   construction

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噬菌體篩選

phage screening

噬菌體顆粒包裝

phage particles package

10~15

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磁珠親和篩選

magnetic beads affinity screening

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陽性克隆回收基因測序

Recover positive clones and DNA sequencing

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抗體表達(dá)

Antibody expression

特異性雙鏈基因合成與Fc基因橋接

synthetic of target   phage gene and Fc gene

~5

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構(gòu)建真核表達(dá)載體

Eukaryotic system   expression plasmids construction

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真核表達(dá)

Eukaryotic system   expression

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穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系構(gòu)建

Stably transfected   cell line construction

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純化與檢測

Purification and detection

標(biāo)簽純化

Tag affinity purification

~1

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特異性親和純化

Antigen specific affinity purification

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總周期（月）

Total lead   time(months)

7~9

3~5

客戶：提供抗原蛋白信息

制備流程：

1）抗原制備質(zhì)粒表達(dá)蛋白純化多肽設(shè)計(jì)合成及交聯(lián)；

2）免疫：*免疫兔子2只，失敗后又加免3只；

3）ELISA/Western-blot試驗(yàn)監(jiān)控兔子血清中的抗體效價(jià)和特異性，根據(jù)ELISA和WB檢測，篩選兔子；

4）cDNA文庫制備與噬菌體載體構(gòu)建；

5）磁珠鏈霉素親和篩選；

6）陽性克隆測序與基因合成橋接；

7）真核表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建；

8）穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞構(gòu)建；

9）試表達(dá)鑒定與結(jié)果交付；

交付產(chǎn)品（每種抗原，所有兔子總共的）

1）1株針對免疫原特異性的單克隆雜交瘤細(xì)胞株

2）1ml（濃度約0.1~1mg/ml）純化的抗體，Elisa效價(jià)應(yīng)至少1:200以上；

制備時間：3~6個月

兔子單克隆抗體制備成功案例：

Publication: Plos One

IF：3.05

Title：TSC1/2 signaling complex is essential for peripheral naïve CD8+ T   cell survival and homeostasis in mice.

Name：anti- Tuberin antibody

Species: Mouse

Type：Rabbit Recombination Monoclonal antibody