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蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色,通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的分子生物學(xué)技術(shù)。
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ARTICLES蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色,通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的分子生物學(xué)技術(shù)。
采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行蛋白質(zhì)樣品的分離,隨后將蛋白轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素薄膜上進(jìn)行固定。固定的目的蛋白即為抗原,因此加入適量的對應(yīng)抗體進(jìn)行免疫反應(yīng),能與抗體緊密結(jié)合的抗原及為目的蛋白。而后加入有標(biāo)記的二抗或酶,因此結(jié)合的抗原-抗體可被檢測到。
大致流程如下:
1. 蛋白質(zhì)的樣品制備
2. 蛋白質(zhì)定量
3. 蛋白質(zhì)樣品SDS-PAGE電泳
4. 轉(zhuǎn)PVDF膜或硝化纖維膜
5. 免疫雜交反應(yīng)
6. 化學(xué)發(fā)光(ECL),顯影,定影
7. 凝膠圖象分析
北京大興亦莊經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)天驥智谷62號樓603
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