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ARTICLES基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP),從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick
軟瓊脂法實驗是一種測定細胞轉(zhuǎn)化及致瘤性的實驗方法。該實驗需要細胞錨定非依賴性生長狀態(tài)(腫瘤細胞生長特性)。相比于2D單層培養(yǎng),該3D培養(yǎng)法的生長條件可以更準確地反映出癌細胞的自然生長環(huán)境,因此動物實驗進行之前的軟瓊脂法實驗是至關(guān)重要的。 實驗前,將細胞(用致癌物質(zhì)或致癌物抑制劑處理的)于軟瓊脂培養(yǎng)21-28天。而后,克隆子可經(jīng)細胞染色法進行形態(tài)學(xué)分析并且計數(shù)。
MTT是一種粉末狀化學(xué)試劑3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,中文為 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽,是一種黃顏色的染料。
分析開始前,黏附細胞需進行細胞分離,制成單細胞懸液,懸液需去除細胞結(jié)塊,死亡細胞和細胞碎片以防止造成對檢測結(jié)果的影響。細胞分離方法有很多,對于分離細胞以組織培養(yǎng)的流式細胞。
與瞬時轉(zhuǎn)染不同,穩(wěn)定細胞系是指外源基因進入受體細胞,并整合到細胞的染色體上,使得宿主可以長期表達目的基因。穩(wěn)定細胞系表達蛋白(抗體)的穩(wěn)定性更好,批次間差異也更小,然而構(gòu)建一個有效的細胞系是一件復(fù)雜而費時的工作——艾柏森專業(yè)的生物醫(yī)藥研發(fā)服務(wù)機構(gòu),擁有豐富的哺乳動物細胞培養(yǎng)經(jīng)驗,基于公司多樣的成熟平臺,為您提供優(yōu)質(zhì)的穩(wěn)定細胞系構(gòu)建服務(wù)。
酵母雙雜交檢測實驗技術(shù)服務(wù) 隨著分子生物學(xué)研究尤其是人類基因組計劃的迅速發(fā)展,為適應(yīng)對眾多基因或蛋白進行功能研究的發(fā)展趨勢,已出現(xiàn)了很多新技術(shù)。其中酵母雙雜交技術(shù)以其簡便,靈敏,高效以及能反映不同蛋白質(zhì)之間在活細胞內(nèi)的相互作用等特點在基因功能的研究中
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