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單克隆抗體制備技術(shù)的應(yīng)用案例

更新時(shí)間:2022-05-17點(diǎn)擊次數(shù):1294
  單克隆抗體制備是相對(duì)于多克隆抗體而言的。單克隆抗體指由單一的漿細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一抗原表位的抗體。當(dāng)機(jī)體受到抗原刺激后,B淋巴細(xì)胞被抗原決定簇激活,增殖分化出大量的漿細(xì)胞,而后由漿細(xì)胞分泌出特異性抗體。1957年,生物學(xué)家伯內(nèi)特提出了克隆選擇學(xué)說:動(dòng)物的每個(gè)B淋巴細(xì)胞都有其*的受體,在受到外界抗原刺激時(shí),特定的B細(xì)胞會(huì)發(fā)生免疫反應(yīng),迅速增殖分化產(chǎn)生相應(yīng)抗體,抵御抗原的入侵。
 
  隨后,人們發(fā)現(xiàn)無論是在體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞還是移植到體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞都具有無限傳代的特點(diǎn),1975年,英國科學(xué)家將壽命長但不能產(chǎn)生特異性抗體的小鼠骨髓瘤細(xì)胞與壽命短但經(jīng)免疫后可產(chǎn)生特異性抗體的漿細(xì)胞在體外進(jìn)行融合,創(chuàng)建了雜交瘤技術(shù)。該技術(shù)所產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞既可以分泌我們所需的特異性抗體,又具有癌細(xì)胞無限繁殖的能力。
 
  單克隆抗體制備技術(shù)的應(yīng)用:
  1.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑
  作為檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的診斷試劑,單克隆抗體以其特異性強(qiáng)、純度高、均一性好等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、放射免疫分析、免疫組化和流式細(xì)胞儀等技術(shù)。并且單克隆抗體的應(yīng)用,很大程度上促進(jìn)了商品化試劑盒的發(fā)展。應(yīng)用單克隆抗體制作的商品化試劑盒廣泛應(yīng)用于:①病原微生物抗原、抗體的檢測(cè);②腫瘤抗原的檢測(cè);③免疫細(xì)胞及其亞群的檢測(cè);④激素測(cè)定;⑤細(xì)胞因子的測(cè)定。
  2.蛋白質(zhì)的提純
  單克隆抗體是親和層析中重要的配體。將單克隆抗體吸附在一個(gè)惰性的固相基質(zhì)上,并制備成層析柱。當(dāng)樣品流經(jīng)層析柱時(shí),待分離的抗原可與固相的單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合,其余成分不能與之結(jié)合。將層析柱充分洗脫后,改變洗脫液的離子強(qiáng)度或pH,與分離的抗原與抗體解離,收集洗脫液便可得到欲純化的抗原。
  3.腫瘤的導(dǎo)向治療和放射免疫顯像技術(shù)
  將針對(duì)某一腫瘤抗原的單克隆抗體與化療藥物或放療物質(zhì)連接,利用單克隆抗體的導(dǎo)向作用,將藥物或放療物質(zhì)攜帶至靶器官,直接殺傷靶細(xì)胞,稱為腫瘤導(dǎo)向治療。另外,將放射性標(biāo)記物與單克隆抗體連接,注入患者體內(nèi)可進(jìn)行放射免疫顯像,協(xié)助腫瘤的診斷。
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